质粒载体(质粒载体有哪些主要类型)

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  1、质粒载体:

  优点:质粒载体通常携带一个或多个选择标记基因(如抗生素抗性基因)和一个含有多个限制性内切酶识别位点的合成多克隆位点序列,去除了大部分不必要的序列,尽可能降低分子量,便于基因工程操作。

  缺点:质粒不是宿主生存所必需的。

  2.噬菌体载体:插入载体只能携带分子量较小(一般小于10kb)的外源DNA片段的插入。

  3.粘粒载体:外源片段以大肠杆菌菌落而不是空点的形式克隆到粘粒载体中。如此获得的菌落总数构成了基因文库。

  扩展数据:

  根据质粒DNA复制与宿主或宿主细胞中拷贝数的关系,质粒可分为两种不同类型的复制:严格型和宽松型。紧凑质粒的复制受宿主染色体DNA复制的严格控制,拷贝数一般只有1~3个拷贝。松散质粒复制宿主的控制比较松散,在宿主中的拷贝数比较多,一般为10~200拷贝,有时可达700拷贝。

  将外源DNA克隆到插入的λ载体分子中,会使噬菌体的某些生物学功能失去效力,称为插入失活效应。插入的λ载体可分为两种亚型:灭活的免疫功能和灭活的大肠杆菌β-半乳糖苷酶

  1.质粒载体的四个基本特征

  1.质粒载体具有独立复制的能力。

  2.质粒载体具有选择标记。

  3.质粒载体具有独特的限制性位点。

  4.质粒载体可以转化,但不能扩散。

  二、质粒的结构和性质

  质粒是细菌染色体外的一种DNA分子,存在于细胞质中,具有自我复制的能力,从而在子细胞中保持恒定的拷贝数,表达其携带的遗传信息。质粒不是细菌生长繁殖的必需物质,可以通过自身丢失或人工处理,如高温、紫外线等方式消除。

  扩展数据

  质粒载体的使用:

  1.基因的过度表达

  一般是将目的片段整合到病毒或质粒载体中,在目的基因上游添加调控元件,将目的基因转染到宿主细胞中进行表达,使大量基因在人工控制下转录和翻译,从而实现基因产物的过量表达,获得大量目的基因产物,一般是蛋白质,用于研究或生产。

  2.用作报告基因

  质粒载体广泛应用于转录调控的研究领域,包括启动子活性分析、miRNA和靶标的识别、转录调控因子的识别以及转录调控因子结合位点的识别。将转录因子表达质粒和报告基因质粒共转染宿主细胞,通过检测报告基因产物的表达来判断启动子与转录因子的结合。

  百度百科-质粒载体

  质粒是一种 *** 的DNA分子,寄生在细菌细胞中,不依赖于染色体。质粒是一种DNA分子。

  质粒通常以超螺旋DNA的形式存在于宿主细胞中。分子大小也相差很大,从不到2kb到100kb以上,大部分都在10kb左右。在细菌、乳酸菌、蓝藻和酵母中发现了质粒,并构建了相应的质粒载体。

  质粒载体是基于质粒DNA分子的克隆载体,含有质粒的复制起始位点,可以以质粒复制的形式进行复制。

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标签:载体基因复制DNA